MAB21L Double Nickase Plasmid (h): sc-409644-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MAB21L Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MAB21L Double-Nickase-Plasmid (h) und MAB21L Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MAB21L1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MAB21L Double Nickase Plasmid (h) | sc-409644-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAB21L Double Nickase Plasmid (h2) | sc-409644-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAB21L1 kodiert MAB21L, ein konserviertes nukleäres Protein, das an Transkriptionsprogrammen beteiligt ist, welche die embryonale Entwicklung und Zellschicksalsentscheidungen koordinieren, mit besonderer Bedeutung für die okuläre und kraniofaziale Morphogenese. Funktionelle Studien bringen Mitglieder der MAB21-Familie mit der Regulation von Differenzierung, Proliferation und morphogengesteuerten Musterbildungswegen in Verbindung, einschließlich Prozessen nachgeschaltet der BMP/TGF-β-Signalübertragung. In der Humangenetik sind pathogene Varianten in MAB21L1 mit angeborenen Augenfehlbildungen und syndromalen Entwicklungsphänotypen assoziiert, was seine Bedeutung in entwicklungsbiologischen genregulatorischen Netzwerken unterstreicht. Diese Eigenschaften machen MAB21L1 zu einem nützlichen Ziel, um Mechanismen der Linienfestlegung (Lineage Specification) und der Biologie entwicklungsbedingter Erkrankungen in Zellmodellen zu untersuchen.
MAB21L Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MAB21L1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MAB21L1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MAB21L1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MAB21L1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.