Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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LZTFL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-430035
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LZTFL1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico LZTFL1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LZTFL1 Antibody (C-6): sc-376022
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LZTFL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-430035 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Lztfl1 codifica LZTFL1, una proteina citosolica coinvolta nella regolazione della struttura e del traffico del ciglio primario, influenzando la segnalazione compartimentalizzata a livello della membrana ciliare. È stata collegata alla modulazione di vie dipendenti dalle ciglia, come la segnalazione Hedgehog, e più in generale a programmi di polarità e differenziamento delle cellule epiteliali. Un’alterata espressione o funzione di LZTFL1 è stata associata a cambiamenti nei fenotipi di migrazione e invasione cellulare, a supporto della sua rilevanza per la biologia del cancro e l’omeostasi tissutale. Nei modelli murini, Lztfl1 viene utilizzato per studiare come la segnalazione ciliare e l’organizzazione epiteliale modellino processi dello sviluppo e correlati a patologie.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LZTFL1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Lztfl1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Lztfl1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Lztfl1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LZTFL1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Lztfl1 per lo studio della segnalazione di LZTFL1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Lztfl1 critici per la funzione di LZTFL1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Lztfl1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal LZTFL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal LZTFL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Lztfl1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal LZTFL1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR LZTFL1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Lztfl1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Lztfl1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.