LYPLA3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409535

Visão geral

PLA2G15 codifica a LYPLA3, uma fosfolipase/desacilase lisossomal implicada no turnover de fosfolipídios e na remodelação de lipídios de membrana por meio da hidrólise de cadeias acila de ácidos graxos. Ao contribuir para o catabolismo lipídico lisossomal, a LYPLA3 se conecta a vias que regulam o tráfego endolisossomal, a degradação associada à autofagia e a homeostase lipídica celular. O processamento lisossomal de lipídios, quando desregulado, é amplamente relevante para respostas ao estresse metabólico e pode influenciar a sinalização inflamatória e a função de organelas, tornando a LYPLA3 um ponto útil para estudar perturbações impulsionadas por lipídios em células humanas. A investigação funcional da LYPLA3 dá suporte a estudos mecanísticos do metabolismo lipídico e de processos centrados no lisossomo que são frequentemente alterados em estados celulares associados a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LYPLA3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PLA2G15 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PLA2G15, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PLA2G15 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LYPLA3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PLA2G15 para a investigação da sinalização de LYPLA3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PLA2G15 críticos para a função LYPLA3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PLA2G15 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LYPLA3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LYPLA3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PLA2G15. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LYPLA3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LYPLA3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PLA2G15 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PLA2G15 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.