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LXR beta/NER/NR1H2CRISPR激活质粒(h) | sc-400691-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
LXR beta/NER/NR1H2CRISPR激活质粒(h2) | sc-400691-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
NR1H2 编码肝 X 受体 β(LXRβ)。LXRβ 是一种由配体激活的核受体,可与 RXR 形成异源二聚体,调控控制胆固醇外排、脂质稳态以及炎症信号的转录程序。LXRβ 将甾醇感知与代谢相关基因表达相整合,影响多条通路,例如逆向胆固醇转运(包括对 ABCA1/ABCG1 的调控)、巨噬细胞泡沫细胞生物学,以及与 NF-κB 相关炎症反应的串扰。在人类组织与细胞模型中,LXRβ 活性异常与脂质代谢紊乱及炎症状态相关,这些状态与动脉粥样硬化、代谢功能障碍和神经炎症密切相关,因此也支持在免疫代谢与神经生物学领域开展机制研究。
LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性NR1H2的表达。
LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的NR1H2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于NR1H2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性LXR beta/NER/NR1H2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的NR1H2位点,并能够研究内源性位点上依赖于LXR beta/NER/NR1H2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在NR1H2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟LXR beta/NER/NR1H2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。