LTBP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405419

概要

LTBP4 は、潜在型トランスフォーミング増殖因子 β 結合タンパク質 4（LTBP-4）をコードしており、フィブリリン微小線維と会合して潜在型 TGF-β 複合体の隔離・貯蔵・生物学的利用能（バイオアベイラビリティ）を制御する細胞外マトリックス糖タンパク質です。これらの相互作用を介して、LTBP-4 は TGF-β 経路シグナル伝達の動態に影響を及ぼし、細胞接着、メカノトランスダクション（機械刺激の情報変換）、および組織弾性を規定するマトリックスの組み立てやリモデリングのプログラムに寄与します。LTBP4 の機能は、エラスチンおよび微小線維成分との協調を通じた弾性線維の恒常性維持と密接に関連し、結合組織における構造的完全性に影響します。LTBP4 の遺伝学的破綻や発現変化は、結合組織および心肺系の表現型と関連づけられており、細胞外マトリックス生物学や TGF-β 依存性疾患機序の研究における重要性を裏づけています。

LTBP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLTBP4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LTBP4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LTBP4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LTBP-4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LTBP-4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LTBP4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LTBP-4の機能に不可欠なLTBP4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LTBP4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LTBP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLTBP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LTBP4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LTBP-4 HDRプラスミド（h）および LTBP-4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLTBP4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLTBP4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。