LTBP-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402289

개요

LTBP1은 잠재형 TGF-β 복합체(latent TGF-β complex)에 결합하는 세포외기질(ECM) 당단백질인 잠재형 형질전환성 성장인자 베타 결합 단백질 1(LTBP-1)을 암호화합니다. LTBP-1은 잠재형 TGF-β 복합체의 격리(sequestration), 활성화, 그리고 세포에 대한 공간적 제시를 조절합니다. TGF-β의 생체이용률(bioavailability)을 조절함으로써 LTBP-1은 SMAD 의존적 신호전달과, 기질 재형성(matrix remodeling), 상피–간엽 전이(EMT), 세포 부착, 조직 항상성에 관련된 하위 프로그램들에 영향을 미칩니다. LTBP1의 기능은 피브릴린 미세섬유(fibrillin microfibril) 조직화 및 기계적 조절(mechanoregulation)에 의한 TGF-β 활성화와 밀접하게 연결되어 있어, 세포외기질 구조와 사이토카인 신호전달을 이어 줍니다. LTBP1/TGF-β 축의 비정상적 활성은 섬유화 관련 재형성, 암 연관 기질(stroma) 신호전달, 혈관/결합조직 병태생리에 관여하는 것으로 알려져 있으며, 미세환경 주도 표현형의 기전 연구에서 중요한 표적입니다.

LTBP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 LTBP1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 LTBP1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 LTBP1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LTBP-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LTBP-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 LTBP1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LTBP-1 기능에 중요한 LTBP1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 LTBP1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LTBP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 LTBP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 LTBP1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LTBP-1 HDR 플라스미드 (h) 및 LTBP-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 LTBP1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 LTBP1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.