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LRP5双切口酶质粒(h) | sc-401331-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRP5双切口酶质粒(h2) | sc-401331-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRP5(低密度脂蛋白受体相关蛋白5)是一种单次跨膜的共受体,可与 Frizzled 受体协同,将经典 Wnt/β-连环蛋白信号通路的信号传递到细胞内。通过调控 β-连环蛋白的稳定性以及 TCF/LEF 依赖的转录,LRP5 参与调节成骨细胞活性、骨量增加、视网膜血管发育,以及更广泛的细胞命运决定程序。LRP5 的功能还与细胞外的 Wnt 调节因子与拮抗因子相互交织,包括 DKK 和硬化蛋白(sclerostin),从而将质膜上的受体可用性与下游转录输出联系起来。LRP5 的遗传变异或失调与骨密度表型改变及眼部血管疾病相关,因此常被用作研究 Wnt 通路调控机制的靶点。
LRP5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LRP5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LRP5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LRP5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LRP5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。