LOK CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423191

개요

Stk10은 마우스에서 림프구 지향성 키나아제(LOK)를 암호화하며, LOK는 STE20 계열의 세린/트레오닌 키나아제로서 상위 신호전달을 세포골격 재구성과 면역세포의 기능적 행동에 연결한다. LOK는 액틴 역학, 세포 극성, 부착을 조절하는 경로에 관여하여 림프구 이동, 면역 시냅스의 조직화, 활성화 신호에 대한 반응성과 같은 과정에 영향을 미친다. 조혈계 맥락에서는 STK10/LOK 신호의 변화가 면역 항상성의 이상과 비정상적인 세포 운동성 표현형과 연관된 것으로 보고되어, 염증 연관 생물학 연구에서 중요한 표적으로 여겨진다. 또한 LOK 기능은 증식과 생존 프로그램을 형성하는 키나아제 조절 체크포인트와도 교차하며, 정상 및 질환 관련 세포 상태에서의 신호 네트워크 기전 연구를 뒷받침한다.

LOK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Stk10 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Stk10 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Stk10의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LOK 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LOK 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Stk10 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LOK 기능에 중요한 Stk10 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Stk10 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LOK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 LOK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Stk10 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LOK HDR 플라스미드 (m) 및 LOK HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Stk10 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Stk10 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.