Lingo-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404453

Visão geral

LINGO1 codifica a Lingo-1, uma proteína transmembranar enriquecida no SNC, contendo repetições ricas em leucina e domínios de imunoglobulina, que atua como componente de complexos receptores que regulam o crescimento neuronal e a mielinização. A Lingo-1 interage com a sinalização do receptor Nogo e vias relacionadas para modular a orientação axonal, o crescimento de neuritos, a diferenciação de oligodendrócitos e a remodelação do citoesqueleto. Por meio de efeitos na comunicação neurônio–glia e em sinais inibitórios no sistema nervoso, a LINGO1 tem sido estudada no contexto de desmielinização, falha na regeneração axonal e processos associados à neurodegeneração. Alterações na expressão ou na sinalização de LINGO1 também foram investigadas quanto ao seu possível impacto na plasticidade sináptica e em respostas neuroinflamatórias em modelos experimentais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Lingo-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LINGO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LINGO1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LINGO1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Lingo-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LINGO1 para a investigação da sinalização de Lingo-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LINGO1 críticos para a função Lingo-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LINGO1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Lingo-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Lingo-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LINGO1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Lingo-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Lingo-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LINGO1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LINGO1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.