LHPP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408945-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LHPPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LHPP (h) e o Plasmídeo Double Nickase LHPP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LHPP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LHPP Anticorpo (B-2): sc-376648
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LHPP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408945-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LHPP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408945-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LHPP (fosfolisina fosfohistidina pirofosfato inorgânico fosfatase) é uma fosfatase de histidina implicada na regulação da fosforilação de histidina em proteínas, uma modificação pós-traducional emergente que influencia a sinalização metabólica e vias de resposta ao estresse. Em células humanas, a atividade de LHPP tem sido associada ao controle de redes de transdução de sinal dependentes de fosforilação, que podem afetar proliferação, diferenciação e a homeostase celular. Alterações na expressão ou na função de LHPP foram relatadas em múltiplos contextos de doença, incluindo biologia do câncer e desregulação metabólica, apoiando seu uso como um nó mecanístico para estudar fenótipos conduzidos por fosforilação.
LHPP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LHPP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LHPP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LHPP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LHPP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.