Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LETM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406163
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LETM1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LETM1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LETM1 Anticorpo (D-5): sc-271235
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LETM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406163 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
LETM1 (proteína transmembrana 1 contendo domínio EF-hand e zíper de leucina) é uma proteína da membrana interna mitocondrial implicada na homeostase iónica mitocondrial e no controlo bioenergético. Contribui para a regulação da morfologia mitocondrial, da organização das cristas e do acoplamento do transporte de iões à fosforilação oxidativa, ligando a atividade de LETM1 ao metabolismo energético celular e às respostas ao stress. Alterações na dosagem de LETM1 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e disfunção mitocondrial, e a sua desregulação tem sido explorada no contexto do metabolismo e da proliferação de células tumorais. Como regulador mitocondrial, o LETM1 é frequentemente estudado pelo seu impacto na sensibilidade à apoptose, na sinalização por espécies reativas de oxigénio e na remodelação de vias metabólicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LETM1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LETM1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LETM1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LETM1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LETM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LETM1 para a investigação da sinalização de LETM1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LETM1 críticos para a função LETM1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LETM1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LETM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LETM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LETM1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LETM1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LETM1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LETM1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LETM1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.