LBX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406846

概要

LBX1（ladybird homeobox 1）は、胚発生におけるパターン形成や細胞系譜の規定を制御するホメオボックス型転写因子をコードしており、特に脊髄介在ニューロンの分化や骨格筋前駆細胞の移動において重要な役割を担います。LBX1は配列特異的にDNAへ結合することで、神経管の背腹軸形成や、体節形成（somitogenesis）に伴う筋形成経路を形作る転写プログラムの協調に寄与します。LBX1の遺伝的多様性や発現制御の変化は、思春期特発性側弯症への感受性を含む発生学的表現型と関連づけられており、筋骨格および神経発達研究における重要性が示されています。細胞モデルでは、LBX1が分化状態、細胞アイデンティティの維持、ならびに下流の転写ネットワークに与える影響を解析する目的で、LBX1が広く研究されています。

LBX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLBX1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LBX1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LBX1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LBX1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LBX1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LBX1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LBX1の機能に不可欠なLBX1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LBX1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LBX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLBX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LBX1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LBX1 HDRプラスミド（h）および LBX1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLBX1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLBX1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。