Latrophilin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411703

Visão geral

ADGRL3 codifica a latrofilina-3, um recetor acoplado à proteína G do tipo adesão (GPCR) enriquecido no sistema nervoso, que atua em contactos célula–célula para regular o desenvolvimento das sinapses, o crescimento de neuritos e a montagem de circuitos. Por meio dos seus domínios extracelulares de adesão e da capacidade de sinalização como GPCR, a latrofilina-3 liga ligandos extracelulares a vias intracelulares que influenciam a remodelação do citoesqueleto, o tráfego vesicular e a conectividade neuronal. Estudos genéticos e funcionais implicam o ADGRL3 em fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, sustentando a sua utilidade como um ponto de entrada molecular para dissecar a organização sináptica e a sinalização ao nível de redes. Assim, a investigação experimental de ADGRL3 é relevante para compreender como a sinalização de GPCRs de adesão contribui para a diferenciação neuronal, a excitabilidade e a manutenção sináptica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Latrophilin-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADGRL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADGRL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADGRL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Latrophilin-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADGRL3 para a investigação da sinalização de Latrophilin-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADGRL3 críticos para a função Latrophilin-3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADGRL3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Latrophilin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Latrophilin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADGRL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Latrophilin-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Latrophilin-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADGRL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADGRL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.