LARP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414019

Visão geral

O membro 4 da família de domínios de ribonucleoproteína La (LARP4) é uma proteína ligante de RNA que se associa à proteína de ligação à poli(A) e regula a estabilidade do mRNA e a eficiência de tradução no citoplasma. Por meio de interações com complexos mRNP e com a maquinaria de tradução, a LARP4 influencia a regulação gênica pós-transcricional, afetando a produção de proteínas e a adaptação celular a sinais de crescimento e estresse. Essas funções conectam a LARP4 a vias que controlam a proliferação celular, a migração e a dinâmica do citoesqueleto, por meio de alterações a jusante no destino dos transcritos e no controle translacional. O metabolismo de RNA e a tradução desregulados são características recorrentes de vários cânceres e de contextos do neurodesenvolvimento, tornando a LARP4 um nó útil para estudos mecanísticos de programas de expressão gênica relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LARP4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LARP4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LARP4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LARP4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LARP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LARP4 para a investigação da sinalização de LARP4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LARP4 críticos para a função LARP4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LARP4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LARP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LARP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LARP4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LARP4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LARP4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LARP4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LARP4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.