LAMP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400120-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LAMP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LAMP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LAMP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LAMP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LAMP1 Anticorpo (H4A3): sc-20011
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LAMP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400120-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LAMP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400120-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAMP1 (proteína 1 associada à membrana lisossomal) é uma proteína de membrana tipo I altamente glicosilada, enriquecida em lisossomos e endossomos tardios, onde sustenta a integridade das organelas e contribui para o posicionamento dos lisossomos, a dinâmica de fusão e a renovação/reciclagem de cargas. Por meio de funções nas vias de autofagia–lisossomo, no tráfego endocítico e na estabilidade da membrana lisossomal, a LAMP1 ajuda a coordenar a capacidade degradativa com as respostas celulares ao estresse. A LAMP1 também participa da degranulação de células imunes e de contextos de processamento de antígenos, conectando a função lisossomal à sinalização inflamatória. A biologia lisossomal desregulada envolvendo a LAMP1 tem sido associada à neurodegeneração, a doenças de armazenamento lisossomal, a interações hospedeiro–patógeno relacionadas a infecções e a fenótipos de invasão e metástase em células cancerosas.
LAMP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LAMP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LAMP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LAMP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LAMP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.