LAL Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421438-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LALO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LAL (m) e o Plasmídeo Double Nickase LAL (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lipa. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LAL Anticorpo (9G7F12): sc-58374
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LAL Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421438-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LAL Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421438-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Lipa** de camundongo codifica a **lipase ácida lisossomal (LAL)**, uma hidrolase que cliva ésteres de colesterol e triglicerídeos dentro dos lisossomos para gerar colesterol livre e ácidos graxos. Essa atividade sustenta a renovação intracelular de lipídios, o tráfego de colesterol e a homeostase metabólica, influenciando a função lisossomal e programas de sinalização responsivos a lipídios. O catabolismo lipídico dependente de LAL interage com vias que regulam o manejo de lipoproteínas, a dinâmica autófago-lisossomo e respostas inflamatórias ao acúmulo de lipídios. A disfunção de **Lipa/LAL** é comumente estudada no contexto de fenótipos de armazenamento lipídico lisossomal e de mecanismos subsequentes de estresse metabólico relevantes para a biologia hepática e de células imunes.
LAL O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lipa em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lipa. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lipa. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lipa interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.