CRISPR 데이터가 아님: 이 이미지는 CRISPR 실험 결과를 시각화하기 위한 항체 품질을 보여줍니다.
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L-type Ca++ CP β2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-403900-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- L-type Ca++ CP β2 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- L-type Ca++ CP β2 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 L-type Ca++ CP β2 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 CACNB2을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 L-type Ca++ CP β2 Antibody (F-29): sc-81890
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
L-type Ca++ CP β2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-403900-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
L-type Ca++ CP β2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-403900-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNB2는 L형 전압개폐성 칼슘 채널의 보조 β2 소단위를 암호화하며, 채널의 수송(trafficking), 막 발현, 그리고 탈분극 동안 Ca2+ 유입의 양상을 결정하는 게이팅 동역학을 조절합니다. CACNB2는 CaV1 채널 활성을 미세 조정함으로써 흥분–수축 연계, 시냅스 전달, 그리고 CaMK 및 칼시뉴린/NFAT 신호전달과 같은 칼슘 민감성 경로를 통한 활성 의존적 유전자 조절에 영향을 줍니다. CACNB2 기능의 변화는 흥분성 조직에서 전기적 및 신호전달 이상과 연관되어 왔으며, 부정맥 감수성, 신경정신과적 표현형, 기타 칼슘 채널 관련 질환의 맥락에서 자주 연구됩니다. 보조 소단위로서 β2는 L형 Ca2+ 전류의 약리학적 민감도와 생물물리학적 특성에도 영향을 미치므로, 채널병증(channelopathy)의 기전 연구에서 중요한 표적입니다.
L-type Ca++ CP β2 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 CACNB2 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 CACNB2 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 CACNB2의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, CACNB2 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.