Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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KLK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403539
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KLK7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KLK7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KLK7 Anticorpo (H-5): sc-514447
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KLK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403539 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KLK7 codifica a peptidase 7 relacionada às calicreínas, uma protease serina secretada que contribui para a homeostase epidérmica ao processar componentes do estrato córneo e modular a descamação. A KLK7 participa de cascatas proteolíticas extracelulares e pode influenciar a função de barreira, a adesão célula–célula e a sinalização inflamatória por meio da clivagem regulada de substratos proteicos no microambiente cutâneo. A expressão ou atividade desregulada de KLK7 tem sido associada à inflamação cutânea e a defeitos de barreira, e é frequentemente investigada em contextos de malignidade epitelial, nos quais a proteólise pericelular pode afetar fenótipos relacionados à invasão. Como resultado, a KLK7 é comumente estudada em vias que ligam a atividade proteolítica à diferenciação, às redes de citocinas e à remodelação da matriz extracelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KLK7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KLK7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KLK7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KLK7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KLK7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KLK7 para a investigação da sinalização de KLK7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KLK7 críticos para a função KLK7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KLK7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KLK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KLK7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KLK7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KLK7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KLK7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KLK7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KLK7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.