KDEL receptor 3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-430617
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- KDEL receptor 3 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在KDEL receptor 3基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
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KDEL receptor 3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-430617 | 20 µg | $397.00 |
概述
Kdelr3 编码 KDEL 受体 3（KDELR3），这是一种定位于高尔基体的回收受体，可识别从内质网（ER）腔内逃逸的分子伴侣蛋白 C 端的 KDEL 基序，并通过依赖 COPI 的逆向运输将其从高尔基体返回内质网。通过维持内质网蛋白质稳态与钙稳态，KDELR3 会影响未折叠蛋白反应（UPR）信号传导、分泌通路的保真性，以及早期分泌区室在应激适应中的重塑。KDEL 受体介导的回收过程一旦受到扰动，可能改变糖蛋白成熟以及对内质网应激的敏感性——这些过程常被用于研究神经退行性疾病、代谢应激以及肿瘤细胞对分泌能力的需求。在小鼠体系中，Kdelr3 是一个便于操控的关键节点，可用于解析 ER–高尔基体运输如何与蛋白质稳态网络及细胞状态转变相互衔接。
KDEL receptor 3 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Kdelr3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Kdelr3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Kdelr3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使KDEL receptor 3蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Kdelr3缺失的细胞模型，用于KDEL receptor 3信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 KDEL receptor 3 功能至关重要的 Kdelr3 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Kdelr3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 KDEL receptor 3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 KDEL receptor 3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Kdelr3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 KDEL receptor 3 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 KDEL receptor 3 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Kdelr3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Kdelr3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。