Plasmide Double Nickase (h) JMJD8: sc-406662-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) JMJD8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide JMJD8 Double Nickase (h) et le plasmide JMJD8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant JMJD8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: JMJD8 Antibody (H-4): sc-515520
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) JMJD8 | sc-406662-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) JMJD8 | sc-406662-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JMJD8 code une protéine contenant un domaine JmjC, impliquée dans la régulation de l’homéostasie protéique et des voies de signalisation adaptatives au stress. Chez l’humain, JMJD8 a été associée à des processus liés au réticulum endoplasmique et à la modulation de voies dépendantes des récepteurs, notamment via des effets sur le repliement et le trafic des protéines, ainsi que sur les mécanismes de contrôle qualité qui façonnent la protéostasie cellulaire. Par ces fonctions, JMJD8 peut influencer la prolifération, la signalisation inflammatoire et les réponses au stress métabolique ou oxydatif. Des modifications de l’expression de JMJD8 ou de l’activité des voies associées ont été rapportées dans plusieurs contextes pertinents pour la maladie, ce qui soutient l’étude de son rôle dans les réseaux de signalisation oncogéniques et la régulation des états cellulaires.
JMJD8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus JMJD8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de JMJD8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de JMJD8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de JMJD8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.