JMJD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401883-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- JMJD3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico JMJD3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
JMJD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-401883-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KDM6B codifica a desmetilase de histonas JMJD3, uma dioxigenase dependente de Fe(II)/2-oxoglutarato que remove marcas repressoras H3K27me3 para promover a ativação transcricional. Por meio de remodelação epigenética, a JMJD3 influencia programas gênicos do desenvolvimento, transições de destino celular, senescência e transcrição responsiva a estímulos a jusante de vias como NF-κB e TGF-β/SMAD. Sua atividade modula a acessibilidade da cromatina em enhancers e promotores específicos de linhagem, contribuindo para a regulação de inflamação e diferenciação em múltiplos tipos celulares. A desregulação da função de KDM6B/JMJD3 tem sido implicada na epigenética do câncer, na biologia de doenças imunomediadas e em outros contextos nos quais estados aberrantes de cromatina alteram redes de expressão gênica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO JMJD3 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KDM6B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KDM6B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KDM6B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína JMJD3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KDM6B para a investigação da sinalização de JMJD3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KDM6B críticos para a função JMJD3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KDM6B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo JMJD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo JMJD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KDM6B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo JMJD3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR JMJD3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KDM6B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KDM6B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.