Plasmide CRISPR/Cas9 KO JDP2 (h): sc-406888

Présentation

JDP2 (Jun dimerization protein 2) est un facteur de transcription de type « basic leucine zipper » (bZIP) qui module l’expression génique dépendante d’AP-1 en formant des hétérodimères avec des membres des familles JUN/FOS et en influençant la structure de la chromatine via des interactions avec des complexes de modification des histones. Il agit comme régulateur dépendant du contexte de programmes cellulaires tels que la différenciation, le contrôle du cycle cellulaire, les réponses au stress et l’apoptose, avec des rôles décrits dans la signalisation du stress oxydatif et les réseaux transcriptionnels inflammatoires. En façonnant les réponses transcriptionnelles en aval des MAPK et d’autres voies sensibles aux stimuli, JDP2 contribue à l’engagement de lignée et aux réponses adaptatives aux signaux de l’environnement. Une expression ou une activité dérégulée de JDP2 a été associée à des phénotypes de prolifération et de survie altérés, pertinents pour la biologie du cancer et des processus liés à l’immunité, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques de la régulation transcriptionnelle.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO JDP2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène JDP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du JDP2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert JDP2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine JDP2.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en JDP2 pour l'étude de la signalisation de JDP2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de JDP2 essentiels à la fonction de JDP2
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de JDP2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le JDP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le JDP2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus JDP2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le JDP2 plasmide HDR (h) et le JDP2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie JDP2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles JDP2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.