ITI-H4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403358

概要

ITIH4 は、インターαトリプシン阻害因子重鎖 H4（ITI-H4）をコードしており、肝臓で高発現する分泌型糖タンパク質です。ITI-H4 はインターαインヒビター（inter-α-inhibitor）ファミリーと関連し、細胞外マトリックスの組織化や、循環中におけるプロテアーゼ活性の調節に寄与します。ITI-H4 は炎症および急性期反応の生物学と関係しており、組織損傷や免疫応答の際に血漿タンパク質組成を変化させるサイトカイン駆動性経路の影響を受けて発現制御されます。ITIH4 の発現やプロセシングの変化は、炎症性疾患やがん関連のプロテオミクスシグネチャーなど、複数の疾患状況で報告されており、機序解明およびバイオマーカーに近い研究ターゲットとしての有用性を支持しています。細胞外環境や細胞‐マトリックス相互作用に影響する可溶性因子として、ITIH4 は炎症、組織リモデリング、ならびに微小環境の制御を司る経路の研究において重要です。

ITI-H4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるITIH4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ITIH4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ITIH4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ITI-H4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ITI-H4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ITIH4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ITI-H4の機能に不可欠なITIH4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ITIH4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ITI-H4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびITI-H4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ITIH4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ITI-H4 HDRプラスミド（h）および ITI-H4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはITIH4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のITIH4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。