ISCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427272-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ISCA1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ISCA1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ISCA1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Isca1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ISCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427272-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ISCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-427272-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ISCA1 de camundongo (Isca1) codifica uma proteína carreadora mitocondrial do tipo A envolvida na maturação de clusters ferro–enxofre (Fe–S), dando suporte à biogênese de cofatores [4Fe–4S] exigidos por componentes da cadeia respiratória e por numerosas enzimas metabólicas. Por seu papel nas etapas finais da montagem de Fe–S, o ISCA1 contribui para a fosforilação oxidativa, a homeostase redox e a manutenção da função mitocondrial sob condições variáveis de ferro celular. A disrupção das vias de clusters Fe–S pode desestabilizar a manutenção do genoma mitocondrial e o transporte de elétrons, associando disfunções relacionadas ao ISCA1 a fenótipos de estresse bioenergético relevantes para mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neuromusculares. Como resultado, o Isca1 é frequentemente estudado no contexto do metabolismo mitocondrial, da sinalização de estresse e de redes de enzimas dependentes de Fe–S.
ISCA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Isca1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Isca1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Isca1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Isca1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.