Plásmido Doble Nickase (h) IRAK-2: sc-404304-NIC

El gen humano **IRAK2** codifica la quinasa 2 asociada al receptor de interleucina 1 (**IRAK-2**), un miembro de la familia de quinasas de serina/treonina que actúa como un intermediario central de señalización aguas abajo de los receptores tipo Toll y del receptor de IL-1. IRAK-2 participa en complejos de señalización dependientes de MyD88, contribuyendo a la activación de las vías de NF-κB y MAPK y moldeando programas transcripcionales que regulan citocinas inflamatorias y respuestas inmunitarias innatas. A través de su papel en la señalización de receptores con dominio TIR, IRAK-2 influye en la activación de células inmunitarias, la señalización de respuesta a patógenos y la interconexión con vías relacionadas con el estrés y la apoptosis. La desregulación de la señalización asociada a IRAK2 se ha vinculado a estados inflamatorios aberrantes y a alteraciones en la señalización inmunitaria observadas en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda su uso como diana mecanística en estudios centrados en vías de señalización.

IRAK-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IRAK2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IRAK2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IRAK2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IRAK2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.