Integrin αV/ITGAV/CD51 Plasmide Double Nickase (h): sc-400506-NIC

ITGAV codifica l’integrina αV (CD51), una subunità α che si associa a diverse integrine β (ad es. β3, β5, β6, β8) per formare recettori per ligandi della matrice extracellulare contenenti motivi RGD, come vitronectina, fibronectina e osteopontina. Attraverso la segnalazione outside-in dipendente dall’adesione, le integrine contenenti αV regolano la dinamica delle adesioni focali, il rimodellamento del citoscheletro e la migrazione cellulare tramite vie che includono FAK/SRC, PI3K–AKT e MAPK/ERK. ITGAV contribuisce inoltre alla meccanotrasduzione e, tramite specifici eterodimeri, può modulare l’attivazione di TGF-β nel microambiente extracellulare, influenzando i programmi epitelio–mesenchimali e il rimodellamento tissutale. La segnalazione deregolata dell’integrina αV è spesso oggetto di studio in contesti di invasione tumorale, angiogenesi, fibrosi e traffico di cellule infiammatorie, rendendo ITGAV un bersaglio comune negli studi sull’adesione e sulla segnalazione del microambiente.

Integrin αV/ITGAV/CD51 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ITGAV nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ITGAV. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ITGAV. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ITGAV interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.