Integrin αM/CD11bCRISPR激活质粒(h): sc-400563-ACT

ITGAM 编码整合素 αM（CD11b），其与 ITGB2（CD18）形成异源二聚体，构成主要表达于髓系细胞上的 Mac-1/CR3 受体。该黏附与模式识别受体调控白细胞滚动、牢固黏附与跨内皮迁移，并通过涉及 Src 家族激酶、Syk、PI3K‑AKT 和 MAPK 的由外向内（outside‑in）信号通路，调节吞噬作用、脱颗粒及氧化爆发。整合素 αM/CD11b 还能识别被补体调理的靶标（iC3b），并参与免疫复合物处理及炎症性细胞因子程序。ITGAM 的遗传变异与表达改变与先天免疫激活失衡相关，已在自身免疫、慢性炎症以及肿瘤相关髓系细胞生物学等背景中得到研究。

Integrin αM/CD11b CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGAM的表达。

Integrin αM/CD11b CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ITGAM基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ITGAM转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Integrin αM/CD11b表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ITGAM位点，并能够研究内源性位点上依赖于Integrin αM/CD11b的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGAM表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin αM/CD11b通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。