Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Insulin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400149-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- Insulin Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- Insulin 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 Insulin 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 INS을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 Insulin Antibody (2D11-H5): sc-8033
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Insulin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400149-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Insulin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400149-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INS는 췌장 β세포에서 프리프로인슐린(preproinsulin)으로 합성되는 펩타이드 호르몬인 인슐린을 암호화하며, 분비 경로에서 가공되어 전신의 포도당 흡수와 저장을 조절합니다. 인슐린 신호전달은 인슐린 수용체 활성화와 그 하위의 PI3K–AKT 및 MAPK 연쇄반응을 통해 진행되며, 이 과정은 포도당 수송체의 이동(트래피킹), 글리코겐 합성, 지질 대사, 유전자 발현을 조율합니다. INS 전사의 정밀한 조절, 전구호르몬의 접힘(folding), 과립의 세포외배출(exocytosis)에 대한 엄격한 제어는 영양 감지와 β세포 항상성의 핵심입니다. 인슐린 생산 또는 신호전달의 이상 조절은 당뇨병 및 관련 대사 표현형과 강하게 연관되어 있어, INS는 내분비 세포 기능과 대사 경로 간 상호작용(crosstalk)을 연구하는 데 중요한 핵심 지점입니다.
Insulin 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 INS 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 INS 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 INS의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, INS 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.