Inhibin β-B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421131

개요

Inhbb는 TGF-β 슈퍼패밀리에 속하는 서브유닛인 인히빈 베타-B를 암호화하며, activin B 동종이량체를 형성하거나 INHBA와 함께 activin AB 이종이량체를 형성하여 SMAD2/3 의존적 전사를 조절합니다. 액티빈 신호는 생식샘 발달, 난포형성, 세르톨리 세포와 과립막 세포 기능을 조절하며, 더 나아가 세포 증식·분화 및 세포외기질 리모델링의 광범위한 조절에도 관여합니다. 마우스에서 Inhbb 활성이 변화하면 생식 관련 표현형과 내분비 조절 이상과 연관되는 것으로 보고되었고, 이 경로는 상황 의존적인 사이토카인 발현 및 조직 리모델링 조절을 통해 염증 및 섬유화 프로그램과도 교차합니다. 이러한 특성 때문에 Inhbb는 발생생물학 및 질환 관련 세포 상태에서 TGF-β/액티빈 경로의 네트워크 구성을 연구하는 데 유용한 핵심 노드입니다.

Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Inhbb 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Inhbb 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Inhbb의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Inhibin β-B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Inhibin β-B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Inhbb 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Inhibin β-B 기능에 중요한 Inhbb 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Inhbb 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Inhbb 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Inhibin β-B HDR 플라스미드 (m) 및 Inhibin β-B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Inhbb 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Inhbb 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.