ILKAP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405879

개요

ILKAP(integrin-linked kinase–associated serine/threonine phosphatase 2C)은 인테그린 연관 신호전달 복합체와 결합하며, 세포 부착과 세포골격 조직화의 인산화 의존적 조절을 조정하는 PP2C 계열 인산가수분해효소를 암호화합니다. 인테그린/ECM(세포외기질) 연관 경로 내의 특정 기질을 탈인산화함으로써, ILKAP은 세포 이동, 기계적 신호전달(mechanotransduction), 성장인자 반응성 신호 출력에 영향을 줄 수 있습니다. ILKAP의 발현 또는 활성 변화는 부착 신호전달의 이상 조절, 스트레스 반응, 악성 표현형을 지지하는 경로 재배선 등이 관여하는 맥락에서 연구되어 왔습니다. 따라서 ILKAP은 종양세포 침윤, 생존 신호, 부착 의존적 증식 조절을 다루는 모델에서 자주 분석되는 표적입니다.

ILKAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ILKAP 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ILKAP 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ILKAP의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ILKAP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ILKAP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ILKAP 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ILKAP 기능에 중요한 ILKAP 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ILKAP 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ILKAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ILKAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ILKAP 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ILKAP HDR 플라스미드 (h) 및 ILKAP HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ILKAP 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ILKAP 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.