IL-27Rα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405846
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IL-27Rα El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IL-27Rα, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-27Rα Anticuerpo (F-7): sc-376309
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IL-27Rα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405846 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IL27RA codifica la subunidad alfa del receptor de IL-27 (IL-27Rα, también conocida como WSX-1/TCCR), una subunidad receptora de citocinas que forma un complejo de señalización con gp130 para mediar las respuestas a IL-27. La activación de IL-27Rα pone en marcha las vías JAK/STAT, especialmente STAT1 y STAT3, lo que orienta la diferenciación de las células T, limita la inflamación excesiva y modula la función de las células presentadoras de antígeno. La señalización dependiente de IL27RA influye en el equilibrio Th1/Th17, en redes reguladoras y en programas génicos sensibles al interferón que se entrecruzan con la comunicación entre la inmunidad innata y adaptativa. La desregulación de este eje se ha vinculado con patología mediada por el sistema inmunitario y con una defensa del huésped alterada, lo que hace de IL27RA una diana útil para estudios mecanísticos en modelos de enfermedades inflamatorias e infecciosas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-27Rα (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IL27RA en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IL27RA junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IL27RA tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-27Rα.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IL27RA para la investigación de la señalización de IL-27Rα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IL27RA críticos para la función de IL-27Rα
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IL27RA para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IL27RA. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-27Rα (h) y el plásmido HDR IL-27Rα (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IL27RA para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IL27RA definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.