Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IL-1ra Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401313
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-1ra O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-1ra, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-1ra Anticorpo (A-4): sc-374084
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-1ra Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401313 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A IL1RN humana codifica o antagonista do recetor de interleucina-1 (IL-1ra), um regulador secretado que inibe competitivamente a ligação de IL-1α e IL-1β ao recetor de IL-1 do tipo I, atenuando assim a sinalização a jusante dependente de MyD88. Ao restringir a ativação, induzida por IL-1, das vias NF-κB e MAPK, a IL-1ra modula programas transcricionais que controlam a produção de citocinas, o recrutamento de leucócitos e as respostas inflamatórias de fase aguda. A atividade desregulada de IL1RN está associada a sinalização imunitária inata aberrante e a limiares inflamatórios alterados, tornando-a relevante para estudos de autoinflamação, vias associadas à artrite e regulação mais ampla de redes de citocinas. A IL1RN também é utilizada como nó marcador para investigar a dinâmica do eixo inflamassoma–IL-1 e o controlo por feedback em macrófagos, células epiteliais e compartimentos estromais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-1ra (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IL1RN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IL1RN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IL1RN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-1ra.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IL1RN para a investigação da sinalização de IL-1ra, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IL1RN críticos para a função IL-1ra
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IL1RN para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-1ra Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-1ra Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IL1RN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-1ra Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-1ra (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IL1RN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IL1RN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.