IL-1F9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406176

概要

IL36Gは、IL-1ファミリーのサイトカインであるインターロイキン36γ（IL-1F9）をコードしており、上皮細胞および骨髄系細胞由来のアラーミンとして自然免疫および獲得免疫応答を増幅します。プロテアーゼによる活性化を受けると、IL-1F9はIL-36受容体複合体（IL1RL2/IL1RAP）を介してシグナルを伝達し、NF-κBおよびMAPK経路を活性化して、白血球の遊走・活性化を促すケモカインや炎症性メディエーターの発現を誘導します。この経路は皮膚や粘膜表面におけるバリア免疫に寄与し、IL-17/IL-23プログラムとのクロストークを通じてTh17関連炎症の形成にも関与します。IL36G活性の制御異常は、乾癬などの炎症性皮膚疾患や、より広範な慢性組織炎症の文脈でも関与が示唆されており、サイトカインネットワークの増幅機構や上皮免疫シグナルを研究するうえで有用な結節点となります。

IL-1F9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIL36G遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IL36G内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IL36Gのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-1F9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-1F9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IL36G欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-1F9の機能に不可欠なIL36Gエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IL36Gゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-1F9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIL-1F9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IL36G遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-1F9 HDRプラスミド（h）および IL-1F9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIL36Gホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIL36G標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。