IL-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421091

概要

マウスのIl16は、免疫調節性サイトカインであるIL-16をコードしており、pro-IL-16前駆体として産生された後、プロセシングを受けて生物活性を有するメディエーターとなります。IL-16は走化性因子として機能するとともに、白血球の活性化を調節します。IL-16シグナルは、炎症組織内におけるサイトカインネットワーク、遊走応答、細胞間コミュニケーションを形成することで、T細胞および単核食細胞の挙動に影響を与えます。これらの作用を介して、IL-16は免疫細胞のトラフィッキングや炎症性シグナルプログラムの制御に寄与し、自己免疫、アレルギー性炎症、感染に関連する免疫調節異常といった病態に関与します。したがって、Il16の撹乱は、マウスモデル系における免疫極性化、白血球リクルート、ならびに炎症に伴う組織リモデリングの機構を解明する上で有用です。

IL-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl16遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il16内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il16のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-16タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-16シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il16欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-16の機能に不可欠なIl16エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il16ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-16 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il16遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-16 HDRプラスミド（m）および IL-16 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl16ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl16標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。