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IGFBP5双切口酶质粒(h) | sc-400945-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP5双切口酶质粒(h2) | sc-400945-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP5(胰岛素样生长因子结合蛋白5)是一种分泌型、与细胞外基质相关的 IGF 信号调控因子,可调节 IGF‑I/IGF‑II 的可利用性及其与受体的结合,从而影响 PI3K–AKT 和 MAPK 通路的输出。除通过结合并“封存”IGF 外,IGFBP5 还可通过与基质的相互作用以及在特定情境下的 IGF 非依赖性效应,参与细胞黏附、迁移与存活等程序。在人体组织中,IGFBP5 的表达与分化和组织重塑过程相关,包括成骨反应与纤维化反应;在生长因子信号改变会影响增殖及细胞外基质动态的研究背景下,IGFBP5 也经常被重点关注。IGFBP5 活性失调与病理性重塑及肿瘤生物学有关,因此在研究生长调控机制与微环境信号传递方面具有重要意义。
IGFBP5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IGFBP5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IGFBP5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IGFBP5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IGFBP5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。