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| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IFT20 Lentiviral Activation Particles (h) | sc-418576-LAC | 200 µl | $455.00 |
IFT20(intraflagellar transport 20)は、一次繊毛の形成と維持に必須な繊毛内輸送(IFT)装置の中核構成因子であり、繊毛依存的なシグナル伝達や極性をもったトラフィッキングを支えています。繊毛での役割に加えて、IFT20はゴルジ体にも局在し、小胞の選別や、膜タンパク質を繊毛および免疫シナプスへ輸送する過程に関与することで、受容体の配置制御やシグナル伝達と結びついています。これらの機能を介して、IFT20はヘッジホッグ(Hedgehog)シグナル伝達などの経路や、繊毛を介した発生・恒常性維持のさまざまなプロセスに影響を与えます。繊毛輸送の異常やIFT複合体機能の破綻は、広く繊毛病(ciliopathy)関連の表現型と関連しており、細胞周期制御、分化、組織形態形成の研究においても重要なテーマとなっています。
IFT20 レンチウイルス活性化粒子(h)は、完全な相乗的活性化メディエーター(SAM)転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なIFT20の発現上昇を可能にします。
IFT20 レンチウイルス活性化粒子(h)は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター(SAM)システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9(D10AおよびN863A変異)をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの;および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、IFT20転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性IFT20の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のIFT20ゲノム座および制御機構を維持します。
レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。