IFN-β Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418564-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-βO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IFN-β (h) e o Plasmídeo Double Nickase IFN-β (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IFNB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IFN-β Anticorpo (A1): sc-53968
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-β Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418564-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFN-β Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418564-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFNB1 codifica o interferão-β (IFN-β) humano, um interferão do tipo I secretado em resposta a infeção viral e à deteção de ácidos nucleicos por recetores de reconhecimento de padrões, como os recetores do tipo RIG-I e a via cGAS–STING. O IFN-β sinaliza através do recetor IFNAR para ativar as vias JAK–STAT e induzir genes estimulados por interferão, que moldam a restrição antiviral, a apresentação de antigénios e o diálogo entre a imunidade inata e a adaptativa. Este programa influencia respostas de stress intrínsecas à célula e redes de citocinas, estando a sua desregulação associada a sinalização inflamatória aberrante e a alterações na defesa do hospedeiro. Assim, a biologia de IFNB1/IFN-β é frequentemente investigada em modelos de infeção, interferonopatias e patologias mediadas pelo sistema imunitário, para dissecar a deteção a montante e as respostas transcricionais a jusante.
IFN-β O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IFNB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IFNB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IFNB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IFNB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.