IFN-αB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421046
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-αB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFN-αB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-αB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421046 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Ifnab** do camundongo codifica o interferon-αB (IFN-αB), um interferon do tipo I que amplifica as defesas antivirais inatas e molda respostas imunes adaptativas subsequentes. Após a sinalização de receptores de reconhecimento de padrões por vias como cGAS–STING, RIG-I/MDA5–MAVS e TLRs endossomais, o IFN-αB liga-se ao IFNAR para ativar a via JAK–STAT e induzir a transcrição de genes estimulados por interferon, que modulam a apresentação de antígenos, a apoptose e redes de citocinas inflamatórias. A atividade desregulada de interferons do tipo I está implicada em inflamação crônica e autoimunidade, e assinaturas alteradas de interferon são frequentemente investigadas em modelos de infecção viral e de patologias mediadas pelo sistema imune. Assim, a função de **Ifnab** é relevante para estudos de interações hospedeiro–patógeno, do programa funcional de células mieloides e linfoides e de respostas teciduais induzidas por interferon.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFN-αB (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ifnab em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ifnab, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ifnab na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFN-αB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ifnab para a investigação da sinalização de IFN-αB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ifnab críticos para a função IFN-αB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ifnab para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFN-αB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IFN-αB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ifnab. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFN-αB Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IFN-αB (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ifnab para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ifnab definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.