
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IDO双切口酶质粒(m) | sc-421024-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Ido1 基因编码吲哚胺 2,3-双加氧酶(IDO),这是一种依赖血红素的酶,催化色氨酸沿犬尿氨酸通路分解代谢的第一步且为限速步骤。通过调控局部色氨酸耗竭与犬尿氨酸积累,IDO 重塑免疫与炎症信号传导,影响 T 细胞反应、抗原呈递细胞功能以及与氧化应激相关的代谢程序。Ido1 的表达可被干扰素及炎症信号诱导,从而将先天免疫激活与组织内的代谢重编程相耦联。IDO 活性失调与慢性炎症、免疫耐受机制以及小鼠体系中的感染、自身免疫模型和肿瘤相关免疫代谢等情境有关。
IDO 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ido1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ido1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ido1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ido1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。