Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
HXK I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401753
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HXK I O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HXK I, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HXK I Anticorpo (G-1): sc-46695
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HXK I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401753 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene humano HK1 codifica a hexoquinase I (HXK I), uma enzima associada às mitocôndrias que catalisa a fosforilação da glicose dependente de ATP em glicose-6-fosfato, comprometendo a glicose com a glicólise e vias biossintéticas relacionadas. Ao controlar a primeira etapa limitante da velocidade na utilização de glicose, a HXK I influencia o equilíbrio energético celular, a homeostase redox por meio do acoplamento à via das pentoses fosfato e o fluxo de metabólitos para a síntese de glicogênio e nucleotídeos. A atividade de HK1 é estreitamente integrada à função mitocondrial e à sinalização associada à apoptose, por meio de interações na membrana mitocondrial externa. Alterações na expressão ou na regulação de HK1 têm sido associadas à desregulação do metabolismo da glicose no câncer e a fenótipos do neurodesenvolvimento e hemolíticos, sustentando sua relevância na pesquisa em biologia metabólica e mitocondrial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HXK I (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HK1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HK1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HXK I.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HK1 para a investigação da sinalização de HXK I, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HK1 críticos para a função HXK I
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HK1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HXK I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HXK I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HK1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HXK I Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HXK I (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HK1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HK1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.