Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Huntingtin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420825-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HuntingtinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Huntingtin (m) e o Plasmídeo Double Nickase Huntingtin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Htt. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Huntingtin Anticorpo (3E10): sc-47757
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Huntingtin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420825-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Huntingtin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420825-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Htt de camundongo codifica a huntingtina, uma grande proteína de suporte estrutural que mantém a homeostase neuronal por meio de funções no tráfego vesicular, na endocitose e na dinâmica do citoesqueleto. A huntingtina participa da regulação transcricional e de redes de proteostase, incluindo a autofagia e a remoção dependente de ubiquitina, além de influenciar a função sináptica e o transporte intracelular. Alterações nos níveis ou na integridade da huntingtina afetam a fisiologia de neurônios do estriado e do córtex e têm sido amplamente estudadas no contexto da neurodegeneração e de fenótipos moleculares relacionados à doença de Huntington. Em sistemas murinos, o Htt oferece um ponto de entrada importante para dissecar a intercomunicação entre vias de transporte axonal, função mitocondrial e sinalização de resposta ao estresse.
Huntingtin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Htt em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Htt. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Htt. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Htt interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.