HuC 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400172-NIC

ELAVL3(HuC)는 뉴런에 풍부하게 발현되는 RNA 결합 단백질로, 표적 전사체의 AU-풍부 서열(AU-rich elements)을 인식하며 mRNA의 안정성, 세포 내 위치(국소화), 번역을 조절함으로써 전사 후 단계의 유전자 발현을 조절합니다. 또한 시냅스 기능과 세포골격 역학과 연관된 RNA 레귤론을 형성해 신경세포의 분화와 유지에 기여하고, 대체 스플라이싱 및 스트레스 반응성 RNA 과립(stress-responsive RNA granules) 생물학 등 더 넓은 RNA 처리 경로와도 연결됩니다. 뉴런의 RNA 결합 단백질 활성 변화와 그에 따른 전사체 프로그램은 신경발달 및 신경퇴행성 기전 맥락에서 자주 연구되며, 이때 ELAVL3는 뉴런 특이적 유전자 조절에서 표지자이자 기능적 허브로 활용됩니다. 인간 ELAVL3 연구에서는 일반적으로 HuC 의존적 RNA 조절이 신경세포의 성숙, 흥분성, 그리고 세포 스트레스 하에서의 취약성에 어떤 영향을 미치는지에 초점을 맞춥니다.

HuC 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ELAVL3 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ELAVL3 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ELAVL3의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ELAVL3 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.