HSP 60 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400336

개요

HSPD1은 미토콘드리아 샤페로닌 HSP60을 암호화하며, 미토콘드리아 기질로 수입되는 핵-암호화 단백질의 접힘과 조립을 촉진하는 샤페로닌 시스템의 핵심 구성 요소입니다. HSP60은 단백질 오접힘을 완충하고 단백질 독성 손상을 제한함으로써 미토콘드리아 단백질 항상성(proteostasis), 산화적 인산화 능력, 그리고 스트레스 반응을 지지합니다. HSPD1의 이상은 미토콘드리아 품질 관리를 교란하고, 미토콘드리아 기능장애와 연관된 세포사멸(apoptosis) 민감도, 산화환원(redox) 항상성, 선천면역 신호전달을 변화시킬 수 있습니다. HSP60의 발현 또는 세포 내 위치의 조절 이상은 신경퇴행, 심장대사 질환, 암 관련 스트레스 적응과 연관되어 왔으며, 따라서 미토콘드리아 신호전달의 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.

HSP 60 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HSPD1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HSPD1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HSPD1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HSP 60 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HSP 60 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HSPD1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HSP 60 기능에 중요한 HSPD1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HSPD1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HSP 60 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HSP 60 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HSPD1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HSP 60 HDR 플라스미드 (h) 및 HSP 60 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HSPD1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HSPD1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.