HS3ST5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-415157

개요

HS3ST5는 헤파란 황산 프로테오글리칸 생합성 과정에서 글루코사민 잔기의 3-O-설페이션(황산화)을 촉매하는 골지체 상주 효소인 heparan sulfate-glucosamine 3-O-sulfotransferase 5를 암호화합니다. 이 변형은 헤파란 황산의 미세 구조를 규정하는 데 기여하며, 세포–세포 간 소통, 부착, 그리고 세포외기질 내 형태형성인자(morphogen)의 분포에 영향을 주는 리간드 결합 특성을 형성합니다. 헤파란 황산 의존적 상호작용을 조절함으로써 HS3ST5는 발달과 조직 항상성을 조절하는 FGF, Wnt, Hedgehog, 케모카인 네트워크 등의 신호전달 경로에 영향을 줄 수 있습니다. 헤파란 황산의 황산화 패턴 이상은 성장인자 가용성 변화, 염증, 종양 미세환경 재구성과 연관되어 왔으며, 따라서 HS3ST5는 질병 연관 글리코사미노글리칸 변화의 기전을 연구하는 데 중요한 표적이 됩니다.

HS3ST5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HS3ST5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HS3ST5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HS3ST5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HS3ST5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HS3ST5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HS3ST5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HS3ST5 기능에 중요한 HS3ST5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HS3ST5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HS3ST5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HS3ST5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HS3ST5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HS3ST5 HDR 플라스미드 (h) 및 HS3ST5 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HS3ST5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HS3ST5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.