HS3ST2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-409766

개요

HS3ST2는 헤파란 황산-글루코사민 3-O-설포트랜스퍼레이스 2를 암호화하는 유전자로, 골지체에 국재하는 효소이며 헤파란 황산 사슬의 3-O-황산화를 촉매합니다. 이 과정은 리간드 결합과 신호전달 특이성을 조절하는 드문 황산화 모티프를 생성합니다. 헤파란 황산–단백질 상호작용을 형성함으로써 HS3ST2는 세포외기질 생물학에 영향을 주고, 세포 부착, 이동, 조직 패터닝을 조절하는 FGF, WNT, VEGF 및 케모카인 매개 신호전달과 같은 경로를 조절합니다. HS3ST2의 발현 변화 또는 후성유전적 침묵은 여러 종양 맥락에서 보고되어 왔으며, 침윤, 전이 연관 미세환경 리모델링, 그리고 성장인자 반응성의 이상 조절과의 관련성에서 연구되고 있습니다. 또한 헤파란 황산 생합성에서의 역할은 황산화 패턴이 수용체 활성화와 농도구배 형성을 미세 조정하는 발생생물학 및 염증 분야의 더 넓은 질문들과도 HS3ST2를 연결합니다.

HS3ST2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HS3ST2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HS3ST2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HS3ST2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HS3ST2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HS3ST2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HS3ST2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HS3ST2 기능에 중요한 HS3ST2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HS3ST2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HS3ST2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HS3ST2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HS3ST2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HS3ST2 HDR 플라스미드 (h) 및 HS3ST2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HS3ST2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HS3ST2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.