Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HPS-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404822
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HPS-4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HPS-4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HPS-4 Anticorpo (A-6): sc-398070
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HPS-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404822 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O HPS4 codifica a HPS-4, um componente central do complexo 3 de biogénese de organelos relacionados com lisossomas (BLOC-3), que funciona como um fator de troca de nucleótidos de guanina (GEF), regulando o tráfego de membranas dependente de Rab32/Rab38. Por estas vias, a HPS-4 apoia a triagem e o encaminhamento de carga para lisossomas e organelos relacionados com lisossomas, influenciando a maturação dos melanossomas, a formação de grânulos densos plaquetários e a homeostase endolisossomal. A disrupção de HPS4 está associada à síndrome de Hermansky–Pudlak tipo 4, uma doença caracterizada por defeitos na biogénese de organelos e no transporte vesicular. Assim, o HPS4 é amplamente utilizado para estudar a dinâmica endossomal, a maturação de organelos e os fenótipos celulares associados a tráfego lisossomal comprometido.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HPS-4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HPS4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HPS4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HPS4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HPS-4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HPS4 para a investigação da sinalização de HPS-4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HPS4 críticos para a função HPS-4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HPS4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HPS-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HPS-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HPS4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HPS-4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HPS-4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HPS4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HPS4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.