HP1β CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403235

개요

CBX1는 이질염색질 단백질 1 베타(HP1β)를 암호화하며, HP1β는 크로모도메인(chromodomain)을 통해 H3K9me2/3를 인식하고 SUV39H 히스톤 메틸전달효소 및 기타 억제 인자들과의 상호작용을 통해 염색질을 응축시키는 보존된 염색질 어댑터입니다. HP1β는 상위 수준의 염색질 구조를 조율함으로써 이질염색질 형성, 전사 침묵화, DNA 복제 타이밍, 그리고 유전체 안정성 유지에 기여합니다. 또한 손상 부위의 접근성을 조절하고 수선 인자의 모집에 영향을 주어 DNA 손상 반응 및 수선 경로 선택에도 관여합니다. HP1β와 연결된 후성유전 프로그램의 조절 이상은 다양한 암 및 신경발달 연구 맥락에서 관찰되는 분화 상태 변화와 유전체 불안정성과 연관되어 왔습니다.

HP1β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CBX1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CBX1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CBX1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HP1β 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HP1β 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CBX1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HP1β 기능에 중요한 CBX1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CBX1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HP1β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HP1β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CBX1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HP1β HDR 플라스미드 (h) 및 HP1β HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CBX1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CBX1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.