Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
HP1β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403235
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HP1β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HP1β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HP1β Anticorpo (4D7B8): sc-517288
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HP1β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403235 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CBX1 codifica a proteína 1 do heterocromatina beta (HP1β), um adaptador de cromatina conservado que reconhece H3K9me2/3 por meio do seu cromodomínio e ajuda a compactar a cromatina através de interações com metiltransferases de histonas SUV39H e outros repressores. A HP1β contribui para a formação de heterocromatina, o silenciamento transcricional, o timing de replicação do DNA e a manutenção da estabilidade do genoma ao coordenar a arquitetura de cromatina de ordem superior. Ela também participa das respostas a danos no DNA e da escolha de vias de reparo ao modular a acessibilidade em loci danificados e influenciar o recrutamento de fatores de reparo. A desregulação de programas epigenéticos ligados à HP1β tem sido associada a estados de diferenciação alterados e à instabilidade genômica observados em diversos contextos de pesquisa em câncer e neurodesenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HP1β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CBX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CBX1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CBX1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HP1β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CBX1 para a investigação da sinalização de HP1β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CBX1 críticos para a função HP1β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CBX1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HP1β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HP1β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CBX1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HP1β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HP1β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CBX1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CBX1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.