Hox11 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423423

개요

Tlx1(Hox11)은 TALE 계열의 홈박스 전사인자로, 배아 패터닝과 기관 형성을 조절하며 특히 마우스에서 비장 발달과 조혈 계통(혈액세포 계통) 운명/계통(specification) 결정에 중요한 역할을 합니다. Hox11은 서열 특이적 조절 요소에 결합하고 PBX/MEIS 단백질과 같은 보조인자와 협력함으로써, 전구세포의 증식·분화·조직 구획화(compartmentalization)를 제어하는 전사 프로그램을 조절합니다. TLX1/Hox11 활성이 비정상적으로 조절되면 발달 프로그램의 이상과 연관되며, 특히 T계통 백혈병 발생 모델에서 종양성 전사 네트워크에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 실험 시스템에서 Tlx1은 발달 유전자 네트워크의 전사 조절과, 형질전환 과정에서 이러한 네트워크가 재배선되는 양상을 분석하기 위한 다루기 쉬운(분석에 유용한) 진입점이 됩니다.

Hox11 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tlx1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tlx1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tlx1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Hox11 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Hox11 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tlx1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Hox11 기능에 중요한 Tlx1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tlx1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Hox11 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Hox11 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tlx1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Hox11 HDR 플라스미드 (m) 및 Hox11 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tlx1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tlx1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.