hnRNP R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404489

Visão geral

HNRNPR codifica a ribonucleoproteína nuclear heterogênea humana R (hnRNP R), uma proteína de ligação a RNA que se associa a transcritos nascente e a complexos ribonucleoproteicos para regular o processamento do pré‑mRNA, a estabilidade do mRNA e a localização subcelular do RNA. A hnRNP R contribui para a regulação gênica pós-transcricional por meio de interações que influenciam o splicing alternativo e o transporte de RNA, conectando o metabolismo nuclear de RNA ao controle da tradução no citoplasma. A desregulação de proteínas ligantes de RNA e de redes associadas ao splicing está implicada em mecanismos de doenças neurodegenerativas e neuromusculares, tornando o HNRNPR um nó útil para estudar a homeostase de RNA. A investigação experimental da hnRNP R dá suporte a análises em nível de via de remodelamento do transcriptoma, à dinâmica de grânulos de RNA responsivos ao estresse e a fenótipos relacionados à proteostase.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO hnRNP R (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HNRNPR em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HNRNPR, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HNRNPR na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína hnRNP R.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HNRNPR para a investigação da sinalização de hnRNP R, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HNRNPR críticos para a função hnRNP R
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HNRNPR para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo hnRNP R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo hnRNP R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HNRNPR. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo hnRNP R Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR hnRNP R (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HNRNPR para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HNRNPR definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.