Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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hnRNP H Double Nickase Plasmid (m): sc-425559-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das hnRNP H Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- hnRNP H Double-Nickase-Plasmid (m) und hnRNP H Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Hnrnph1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
hnRNP H Double Nickase Plasmid (m) | sc-425559-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Hnrnph1** kodiert das heterogene nukleäre Ribonukleoprotein H (hnRNP H), ein RNA-bindendes Protein, das G-reiche Motive erkennt und dadurch das Spleißen von prä-mRNA, alternative Polyadenylierung sowie weitere RNA-Verarbeitungsschritte reguliert, die das Spektrum der Transkript-Isoformen bestimmen. hnRNP H wirkt innerhalb spliceosomaler und kotranskriptioneller Netzwerke der RNA-Reifung und beeinflusst die mRNA-Stabilität und Translation über seinen Einfluss auf Exon-Inklusion und 3′-Endbildung. Eine veränderte hnRNP-H-Aktivität kann Isoformen-Gleichgewichte in neuronalen und proliferativen Programmen verschieben, wodurch **Hnrnph1** ein nützlicher Genort ist, um Mechanismen zu untersuchen, die RNA-Prozessierung mit der Regulation von Zellzuständen und krankheitsassoziiertem Umbau des Transkriptoms verknüpfen. Forschung zu **Hnrnph1** unterstützt zudem die Untersuchung, wie Störungen von Spleißfaktoren sich durch genregulatorische Schaltkreise und eine stressresponsive RNA-Metabolik fortpflanzen.
hnRNP H Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Hnrnph1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Hnrnph1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Hnrnph1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Hnrnph1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.